实验原理
根据Beer-Lambert定律,溶液对于单色光的吸收,遵守下列关系式:
(1)
式中A为吸光度;I/I。为透光率;k为摩尔吸光系数,它是溶液的特性常数;l为被测溶液的厚度;c为溶液浓度。
在分光光度分析中,将每一种单色光,分别、依次地通过某一溶液,测定溶液对每一种光波的吸光度,以吸光度A对波长λ作图,就可以得到该物质的分光光度曲线,或吸收光谱曲线,如图1所示。由图可以看出,对应于某一波长有一个最大的吸收峰,用这一波长(最大吸收波长)的入射光通过该溶液就有着最佳的灵敏度。
? 分光光度曲线
对于固定长度吸收槽,在对应最大吸收峰的波长(入)下测定不同浓度c的吸光度,就可作出线性的A~C线,这就是光度法的定量分析的基础。
对含有两种以上组分的溶液:
1)若两种被测定组分的吸收曲线彼此不相重合,这种情况很简单,就等于分别测定两种单组分溶液。
2)两种被测定组分的吸收曲线相重合,且遵守Beer-Lambert定律,则可在两波长λ1及λ2时(λ1、λ2是两种组分单独存在时吸收曲线最大吸收峰波长)测定其总吸光度,然后换算成被测定物质的浓度。本实验是用分光光度法测定弱电解质(甲基红)的电离常数,由于甲基红本身带有颜色,而且在有机溶剂中电离度很小,所以用一般的化学分析法或其它物理化学方法进行测定都有困难,但用分光光度法可不必将其分离,且同时能测定两组分的浓度
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